产品货号:
YTB3595
中文名称:
0.5M TCEP溶液(pH6.8)
英文名称:
0.5M TCEP(pH6.8)
产品规格:
2mL|10mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品为0.5M TCEP溶液,用NaOH调节pH值至6.8,常作为DTT的替代物用于蛋白上样缓冲液和其它还原试剂的配制。
保存:2~8℃,有效期1年。
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组分 | 2mL | 10mL |
0.5M TCEP溶液(pH6.8) | 2×1mL | 10mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:2~8℃,有效期1年。
- 本制品用于蛋白变性时,建议95℃水浴或PCR仪加热5分钟,温度过高(如100℃)或时间过长(如超过15分钟),有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。
- 本制品在磷酸盐缓冲液中,尤其在中性或碱性磷酸盐缓冲液中很不稳定。因此若实验过程需将本制品配制在PBS缓冲液中使用,必须现配现用。
- 大多数蛋白无需变性剂即可高效还原,但加入盐酸胍等变性剂有助于将内部二硫键暴露而易于和TCEP发生反应。
- 不建议使用尿素作为变性剂,避免形成氰酸酯并与巯基反应。
- 尽量防止金属接触TCEP溶液,否则会一定程度降低TCEP活性。在还原过程中向样品缓冲液中加入5至20mM EDTA有助于防止巯基被二价金属离子氧化,如Zn2+、Cu2+和Mg2+等。
- 还原后样品应尽快使用,长时间放置后会重新生成二硫化物。
- 本制品在溶液中带电荷,因此不适用于等电聚焦(IEF)实验。
- TCEP对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
- 在不含DTT或β-ME的2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(100mM Tris,20%甘油,4% SDS,0.005%溴酚蓝,pH6.8)中加入本制品,至TCEP终浓度为50mM,吹打或斡旋混匀。
- 将等体积的上述2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液与蛋白提取液加入到新的离心管中并混匀,沸水浴中煮5min。
- 样品冷却后,在离心机中瞬离,然后取上层溶液进行Western blot实验。
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